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XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化学感受态细胞

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产品名称: XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化学感受态细胞
产品型号: 11810YB80
产品展商: YBscience
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简单介绍

XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化学感受态细胞是经特殊工艺处理得到的感受态细胞,特别适合于大分子量DNA的高效转化。具有四环素和氯霉素抗性,使用Puc19质粒测得其转化效率达108cfu/μg, XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化学感受态细胞更适于质粒文库的构建


XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化学感受态细胞  的详细介绍

XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化学感受态细胞


产品描述

XL10-Gold化学感受态细胞是经特殊工艺处理得到的感受态细胞,特别适合于大分子量DNA的高效转化。具有四环素和氯霉素抗性,使用Puc19质粒测得其转化效率达108cfu/μg,主要具有如下特点:

 Hte表型可增强较大分子量质粒和连接产物的高效转化;

 具有限制性内切酶缺陷性,更利于克隆 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取;

 更适于质粒文库的构建;

 具有lacIqZΔM15,可用于蓝、白斑筛选。

本品基因型:

TetrΔ(mcrA)183Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [FproAB lacIqZΔM15 Tn10 (Tetr) Amy Camr]

XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化学感受态细胞产品组分

编号

组分

规格

保存温度

11810-A

XL10-Gold化学感受态细胞

100 μl × 10

-80

11810-B

pUC1910pg/μl

10 μl × 1

-20

XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化学感受态细胞运输与保存方法

干冰运输。

XL10-Gold化学感受态细胞-80保存,pUC19质粒-20保存。有效期半年。不能保存于液氮!

XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化学感受态细胞注意事项

1)感受态细胞应保存在-80,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2)整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3)为确保*高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温,且每次转化感受态使用量,不低于100μl

4)为防止转化不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,*低化实验可能遇到的风险。

XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化学感受态细胞使用方法

1)取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

2)向100μl感受态细胞悬液中加入0.1-50ng(<10μl /100μl感受态)目的DNA2μl连接产物,轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置30min

3)置于42水浴中热激30s,然后快速将管转移到冰浴中,冷却2-3min,该过程不要摇动离心管,否则会降低转化效率。

4)向离心管中加入900μl 42预热的无菌NZY+培养基(不含***),混匀后置于37摇床振荡培养1h225-250rpm),目的是促使菌体复苏。

   【注】:此步也可用LB培养基(不含***)进行菌体复苏。

5)取上述≤200μl转化产物涂至含有相应***的LB固体平板上,将平板倒置放于37培养箱过夜培养。

【注】:如需做蓝白斑筛选,需至少孵育17h,以充分显色。


附录一:常用***工作浓度

***

翊圣货号

常用工作浓度

Ampicillin 氨苄青霉素

60203YB10

100 μg/ml

Carbenicillin羧苄青霉素

60202YB08

100 μg/ml

Chloramphenicol 氯霉素

60205YB10

33 μg/ml

Kanamycin 卡那霉素

60206YB10

30 μg/ml

Streptomycin 链霉亲和素

60211YB60

25 μg/ml

Tetracycline 四环素

60212YB25

15 μg/ml

 

附录二 NZY+培养基配方

10 g of NZ amine (casein hydrolysate)

5 g of yeast extract

5 g of NaCl

Add deionized H2O to a final volume of 1 liter

Adjust to pH 7.5 using NaOH and then autoclave

Add the following filer-sterilized supplements prior to use:

12.5 ml of 1 M MgCl2

12.5 ml of 1 M MgSO4

20 ml of 20% (w/v) glucose (or 10 ml of 2 M glucose)

 

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规格

价格(元)


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